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hiv的检测及意义

来源:上海健康网 日期:2007-09-13

  HIV劝化的实践室检测在HIV劝化的诊断、疾病进展的监测、抗病毒疗效观察和耐药性监测中至关繁重。但HIV检测倜然于其它病原微生物检测,乞求十分严密,任何错误的诊断,包罗假阳性或假阴性,都会对被检者引发十分繁重的关系。因此,HIV检测必须严密模拟国家定出的《艾滋病检测上班修理门道》和《艾滋病检测技能规范》(以下简称《规范》)向前。

  HIV劝化的诊断

  hiv的检测-1.HIV抗体检测:旁边国外用于HIV抗体筛查的点子雅量,模拟检测原理倜然分为酶联免疫吸附法、凝集法和免疫层析法,可对血液、唾液和尿液标本向前惯例或急剧检测。在老实上班中常用的有酶联免疫吸附试验(ELISA)、明胶凝集试验和各种急剧诊断试剂。自1985年第一代ELISA试剂问世以来,随着医学技能的飞速进展,包被抗原已从第一代的全病毒裂解物进展为旁边以基因重组与多肽抗原包被和标志的有着出色敏感性和特异性的第三代双抗原夹心试剂,检测亚型包罗HIV-1、HIV-2和HIV-1型的O亚型,窗口期由10周缩短至3~4周。为避免窗口期传染,荷兰、法国等国已研制出可同时检测抗原抗体的第四代ELISA筛查试剂,但其临床价值有待估算。按《规范》乞求,我国采供血机构向前血液筛查和各医疗卫活力构惯例筛查检测宜运用ELISA法,自采自供血的单位必须向前HIV抗体检测,在尚未修筑艾滋病筛查实践室的僻野区域或大医院急诊手术前可由通过培训的技能人员在规定的场所用急剧检考验剂向前血液筛查。对用ELISA试剂或急剧诊断试剂向前的筛查实践如呈阴性反应,即报告HIV抗体阴性;对呈阳性反应的标本,筛查实践室承受同意原有试剂和此外一种倜然原理或倜然厂家的试剂向前重复检测,如两种试剂复测均呈阴性反应,则报告HIV抗体阴性;如均呈阳性反应,或一阴一阳,需送艾滋病精确实践室向前精确。筛查试剂必须是HIV-1/2混合型、经国家药品督察修理局(SDA)注册准许、批检够格、临床估算质量最好、在有效期内的试剂。

  HIV抗体筛查呈阳性反应的标本由于搁置假阳性的估量,必须做精确试验。国际上有3种精确试验点子,包罗免疫痕迹试验、条带免疫试验及免疫荧光试验,旁边以免疫痕迹试验最为常用。精确试剂必须经SDA注册准许。免疫痕迹试剂有HIV-1/2混合型和纯挚型,按《规范》乞求,一般先用HIV-1/2混合型试剂向前检测,模拟《规范》中评理免疫痕迹试验结果的基本原则并对比所用试剂判明书归并评理:无HIV抗体特异带出世的报告HIV抗体阴性;出世HIV抗体特异带,合格HIV-1抗体阳性评理目的,则报告HIV-1抗体阳性。如出世HIV-2型的特异性条带,需用HIV-2型免疫痕迹试剂再做纯挚的HIV-2型抗体精确试验,呈阴性反应,报告HIV-2抗体阴性;呈阳性反应的则报告HIV-2抗体血清学阳性,如需鉴别应向前核酸序列分析。假制定世HIV抗体特异带,但带型短缺以评理为阳性,则判为HIV抗体不确凿。对HIV抗体不确凿者应按《规范》乞求向前随访,必要时可做HIV-1 P24抗原或核酸测定,但检测结果只能作为相助诊断假冒,精确报告要假冒血清学随访结果。由于旁边唾液检考验剂的敏感性和尿液检考验剂的特异性明显低于血液检考验剂,旧我国SDA已注册准许的HIV抗体筛查和精确试剂只能用于血液标本检测。

  旁边抗体精确试验阳性是我国HIV劝化诊断目的中不可贫乏的,不能仅凭临床发扬评理是否为HIV劝化或艾滋病。

  hiv的检测-2.P24抗原和HIV核酸检测:HIV劝化人体后有一段窗口期,旁边用于HIV抗体检测的第三代ELISA试剂窗口期为3~4周,在该期病毒抗体不能被检出,但可检测到病毒拉扯抗原或让步出病毒,故在窗口期检测P24抗原是早期相助诊断和进一步缩短窗口期的一种点子,还可用于HIV阳性母亲所生婴儿的早期相助鉴别诊断。HIV-1 P24抗原检测一般用ELISA双抗体夹心法试剂(经SDA准许注册),阳性结果必须经中和试验精确,该结果才可作为HIV劝化的相助诊断假冒。HIV-1 P24抗原检测阴性,只表示在本试验中无反应,不能减去HIV劝化。

  HIV核酸检测,通常是检测HIV RNA,往日只能定性检测血液中是否搁置病毒核酸,而旁边的技能可恒量检测血液中病毒复制水平。HIV核酸定性检测可用于HIV劝化的相助诊断,通常使用PCR或RT-PCR技能,使用分子生物学实践室通用的扩增试剂,引物可来自文献或自行构划,应尽量掩盖整套或习见的毒株,也可使用查证引物。值得谅解的是, HIV核酸定性检测阴性,只可报告本次实践结果阴性,但不能减去HIV劝化;HIV核酸检测阳性,可作为诊断HIV劝化的相助指标,不能单独用于HIV劝化的诊断,报告定性检测结果时还应表明反应条件和所使用的引物序列。报告HIV核酸恒量检测结果时应模拟仪器读数报告结果,表明使用的试验点子、样品品种和样品量,当测定结果小于最小检测限时,应表明最小检测限水平,低于最小检测限的结果不能减去HIV劝化。

  疾病进展的实践室监测:在HIV劝化中,CD4+T淋巴细胞计数及血浆HIV RNA水平(病毒载量)可以为临床医生提供患者病毒水平、免疫形态的拉扯资料,是预测疾病进度的牢靠指标。这两项实践还可独立预测艾滋病临床过程和存活期。

  流式细胞仪是检测CD4+T淋巴细胞计数的目的点子,可以得出CD4+T细胞占淋巴细胞的比值及绝对值。CD4+T细胞计数是艾滋病诊断、疾病分期的实践室目的指标(表1)。用于病毒载量的检测点子有逆转录PCR、核酸序列扩增实践(NASBA)、分支DNA杂交实践(bDNA)等,其结果多用于监测HIV劝化者的病程进展和抗病毒治疗结局。对于未向前抗病毒治疗的HIV劝化者,优异在诊断为HIV劝化时检测CD4+T淋巴细胞绝对值及病毒载量,往后每3~6个月检查CD4+T细胞计数,每3~4个月检测病毒载量,以有益临床医生定时控制HIV劝化者和艾滋患者的疾病进展信息。值得谅解的是,由于倜然的血浆病毒载量检测点子结果有所分岐,故在对同一患者向前疾病进展观察及疗效估算时,优异在同一实践室承受同意相同的检测点子以有益对检测结果的分析。

  hiv的检测-抗病毒治疗的疗效观察

  1.治疗时机:在CDC于 2002年定出的《艾滋病诊断与治疗指数方案》(以下简称《方案》)试行版中确认规定,对急性劝化期患者HIV血清阳转6个月之内和整套出世艾滋病临床症状的患者应给与抗病毒治疗。对于无症状期劝化者,其抗病毒治疗时机须对比CD4+T细胞计数及病毒载量归并评理。

  2.估价治疗结局:取胜的抗病毒治疗应该完结以下结局:血浆中HIV-RNA的水平4周内应贬值1个Log以上, 4~6个月内病毒降至检测不到的水平(HIV RNA<50拷贝/ml),CD4+T淋巴细胞计数应逐渐提高。假定达不到相应指标,则应模拟实践室检测结果调整治疗方案。

  3.调整用药假冒:为了保障抗病毒治疗的结局,延迟耐药性引发,在向前抗HIV治疗时,应定期向前CD4+T细胞计数及病毒载量检测。《方案》中规定,如出世下列信息则应调整用药:⑴经HAART治疗8周后,血浆中病毒载量比原水平降低没有跨越1.0 log;⑵经HAART治疗6个月后,血浆中病毒载量没有降至测不出的水平(<50拷贝数/ml);⑶血浆中病毒载量经HAART治疗已完结测不出的水平后又出世提高,提示出世了耐药;⑷除非并发劝化、疫苗接种、检测点子的变化无穷,血浆病毒载量从最小点提高3倍或更高;⑸CD4+T细胞坚持性减轻并出世临床恶化。

  hiv的检测-抗病毒治疗的耐药监测:随着我国抗HIV治疗的促进,耐药性的监测越来越相遇讲究。HIV病毒耐药分为原发性(Primary)及继发性(Secondary)两种,前者指那些径直关系抗病毒药物作用靶点的变异,占有药物特异性,可降低抗病毒药物敏感性;继发性变异又称为补偿变异,常出世于原发性变异已搁置的病毒基因组中,原发性变异可组装复制主要酶的变化无穷,导致病毒动力学的不利,继发性变异可纠正由原发性变异导致的不利,长进病毒的耐药性,对原发性变异起到顾惜和促使作用[2]。在HAART治疗中,病毒变异使得治疗的敏感性贬值,往往导致治疗溃散。

  旁边耐药性检测有两种点子,即表型检测及基因型检测。表型检测通行用药期间的病毒哺育向前,而基因型检测则通行分子生物学点子检测与耐药性拉扯的病毒基因突变。基因型检测的买价较低,技能也相对垂手,可在样品收集后1~2周得到结果,但分析基因型耐药检测时,需要控制好多拉扯知识,如突变与抗病毒药物及其它药物的错落耐药等,实力对结果向前精确的分析。表型检测可以径直检测病毒的耐药性,但操作复杂、耗时,技能乞求高,且异常名优,因此旁边国际上普遍承受同意于临床的是基因型耐药检测。

  美国和西欧的研究报道,约5~16%的新劝化者为HIV-1耐药株劝化[3]。徐军强等对16例我国HIV劝化者向前基因型耐药变异检测,仅感知1例在HAART治疗前搁置原发性耐药变异[4],我们实践室对10例治疗前的我国HIV/AIDS患者向前耐药检测,未感知原发性变异,有3例搁置蛋白酶区继发性变异,提示我国绝好多数HIV/AIDS患者对HAART治疗结局应该是敏感的。临床医生应规范治疗,定时检测CD4+T细胞及病毒载量变化。

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